剛果紅染色在全自動生物組織染色機的應(yīng)用
時間:2023-10-05
全自動生物組織染色機主要是針對一些生物組織進行染色,下面小編就和大家去介紹一下兩種剛果紅染色法有什么優(yōu)缺點。
常用的剛果紅染色法有兩種,一種是先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進行顏色反應(yīng),另一種是在倒平板時就加入剛果紅。
方法一: 在長出茵落的培養(yǎng)基上,覆蓋質(zhì)量濃度為1 mg/mI.的CR溶液,10~15 min后,倒去CR溶液,加入物質(zhì)的量濃度為l mol/I.的NaCI溶液,15 min后倒掉NaCl溶液,此時,產(chǎn)生纖維素酶的茵落周圍將會出現(xiàn)透明圈。
方法二: 配制質(zhì)量濃度為10mg/mI.的CR溶液,滅菌后,按照每200mI培養(yǎng)基加入1mI的比例加入CR溶液,混勻后倒平板。等培養(yǎng)基上長出茵落后,產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會出現(xiàn)明顯的透明圈。
兩種剛果紅染色法的比較剛果紅在篩選纖維素分解菌上的應(yīng)用已經(jīng)有超過20年的歷史,課本中給出了兩種方法。
方法一: 是傳統(tǒng)的方法,缺點是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜;其優(yōu)點是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。
方法二: 優(yōu)點是操作簡便,不存在菌落混雜問題,缺點是由于在纖維素粉和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì),可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊,因為培養(yǎng)基中纖維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點是:有些微生物具有降解色素的能力,它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅而形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分。
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